AEC syndrome is characterized by long-lasting skin erosions for which there is no effective treatment. The disorder is caused by specific mutations in the p63 gene encoding a crucial pioneer transcription factor required for epidermal gene expression. We previously demonstrated that AEC p63 mutations cause protein misfolding and aggregation, thus exerting a dominant negative effect. The main objective of this project is to establish the efficacy and safety of therapeutic strategies for AEC syndrome to resolve skin erosions in vivo or ex-vivo in combination with cell therapy. Using a novel mouse model, we demonstrated the efficacy and safety of an exon-skipping approach. Currently we are developing a safe strategy for gene correction in human primary keratinocytes with a single set of reagents for all AEC mutations, greatly simplifying future therapeutic intervention. Here, we show that with a highly efficient and non-toxic viral-free method, we can achieve more than 90% correction of p63 protein function in seventy-two hours ex vivo, without affecting the clonogenic potential of human primary keratinocytes. In parallel, we are validating small molecules that we have recently identified in a high throughput screening to alleviate the detrimental effects of AEC mutant p63. The proposed state-of-the-art technologies for genome editing in epidermal stem cells and the use of small molecules that are capable of reactivating mutant p63 will greatly contribute to cure untreatable skin erosion in AEC syndrome
La sindrome AEC o sindrome di Hay-Wells è caratterizzata da erosioni cutanee di lunga durata per le quali non esistono trattamenti efficaci. La patologia è causata da specifiche mutazioni nel gene p63 che codifica per un fattore fondamentale per la pelle. L'obiettivo di questo progetto è dimostrare l'efficacia e la sicurezza delle strategie terapeutiche per la sindrome AEC per curare le erosioni cutanee. Utilizzando un nuovo modello murino, abbiamo dimostrato l'efficacia e la sicurezza di un approccio che prevede una modifica genetica. Attualmente stiamo sviluppando una strategia sicura per la correzione genica nei cheratinociti primari umani con un singolo set di reagenti per tutte le mutazioni AEC, semplificando notevolmente il futuro intervento terapeutico. In questo lavoro dimostriamo che con un metodo altamente efficiente e non tossico, possiamo ottenere una correzione del gene mutato superiore al 90% in poche ore e su cellule umane della cute, cosa che permetterà in futuro di trattare e risolvere le erosioni cutanee. Parallelamente, stiamo validando piccole molecole che abbiamo recentemente identificato in uno screening ad alto rendimento per alleviare gli effetti dannosi delle mutazioni.
Le tecnologie all'avanguardia proposte di modifica del genoma nelle cellule staminali epidermiche e l'uso di piccole molecole in grado di riattivare il gene mutante contribuiranno notevolmente a curare le erosioni cutanee nella sindrome AEC